Efectos de la administración preovulatoria de Triiodotironina (T3) sobre el desempeño reproductivo y desarrollo larvario en Yamú Brycon siebenthalae¹

García Tisnes J. M.V.Z.; Arias Castellanos J. A. Biólogo MSc PhD; Cruz-Casallas P. E. M.V.Z. MSc PhD; Instituto de Acuicultura de la Universidad de los Llanos, Villavicencio, Meta – COLOMBIA

(Recibido: Febrero 9 de 2004 - Aceptado: Mayo 7 de 2004)

R E S U M E N

Fueron evaluados dos protocolos de tratamiento hormonal para determinar los efectos de la administración preovulatoria de triiodotironina (T3) sobre la respuesta a la inducción de la maduración final de la gónada y de la ovulación, así como sobre la sobrevivencia y desarrollo larvario en yamú (Br ycon siebenthalae). Para este propósito fueron formulados tres tratamientos: En el tratamiento 1 (Ge), 20 hembras recibieron dos inyecciones IM (0,5 y 5,5 mg.kg^-1 ) de Extracto de Hipófisis de Carpa (EPC), aplicadas con 12 h de intervalo, más 20 mg.kg^-1 de T3 disueltos en 0,1mL de aceite de hígado de bacalao, administrados simultáneamente con la primera inyección de EPC. El tratamiento 2 (Gt), constituido por 22 ejemplares, recibió únicamente las dos inyecciones de EPC. A un tercer grupo (Gc), compuesto por seis hembras, se le administró solamente los vehículos de las sustancias suministradas. Durante todo el periodo experimental, la temperatura ambiente fue de 26,5 ± 0,2 °C. En el grupo Ge, el intervalo entre la última inyección de EPC y la ovulación fue significativamente menor (p<0,05) que en el Gt (6,9 ± 0.1 y 7,9 ± 0,1 h, respectivamente). Las hembras de Gc no ovularon. La eclosión de embriones provenientes de hembras Ge ocurrió en menor tiempo que en aquellos de hembras Gt (p<0,05). Sin embargo, los porcentajes de fertilidad y sobrevivencia embrionaria no mostraron diferencias significativas entre grupos (p>0,05). Finalmente, a las 72 h posteclosión, larvas descendientes de hembras tratadas con T3 mostraron menor sobrevivencia (p<0.05), aunque aparentemente presentaban un desarrollo corporal más homogéneo, cuando comparadas con el grupo Gt.

Palabras clave: yamú, Br ycon siebenthalae, triiodotironina T3, Inducción de la Ovulación, larvicultura.

A B S T R A C T

Two protocols of hormonal treatment were evaluated to determine the effects of the preovulatory triiodothyronine (T3) administration on the answer to the induction of the final gonadal maturation and the ovulation, as well as on the larvae survival and embr yo development in yamú (Br ycon siebenthalae). For this purpose three treatments were formulated: In the treatment 1 (Ge), 20 females received two injections IM (0,5 and 5,5 mg.kg^{- 1}) of Extract of Hypophyfisis of Carp (EPC), applied with 12 h of interval, more 20 mg.kg^-1 of T3 dissolved in 0,1mL of oil of cod liver, administered simultaneously with the first injection of EPC. The treatment 2 (Gt), constituted by 22 females, received two injections of EPC only. A third group (Gc), composed by six females, were administered only the vehicles of the given substances. During the whole experimental period, the ambient temperature was of 26,5 ± 0,2° C. In the group Ge, the interval between the last injection of EPC to the ovulation was significantly smaller (p <0,05) that in the Gt (6,9 ± 0.1 and 7,9 ± 0,1 h, respectively). The females of Gc didn’t ovulate. The hatch of embryos coming from female Ge happened in smaller time that in those of female Gt (p <0,05). however, the percentages of fertility and embryonic survival didn’t show significant differences among groups (p>0,05). Finally, at the 72 h posthatching, lar vae from females treated with T3 showed smaller sur vival (p <0.05), although seemingly they presented a more homogeneous corporal development, when compared with the Gt group.

Key word: yamú, Br ycon siebenthalae, reproduction, triiodothyronine, T3, larviculture.

I N T R O D U C C I Ó N

El yamú ha venido siendo investigado intensamente durante los últimos años con el fin de formular un paquete tecnológico para su cultivo en cautiverio, ya que su rápido crecimiento, fácil aceptación de concentrados comerciales y de alimentos suplementarios (semillas de maíz y soya, hojas de plátano, bore, frutas y vísceras), así como su alta conversión alimenticia bajo condiciones de cultivo (Arias 2001), lo convierten en una especie con alto potencial para la piscicultura continental. Sin embargo, la oferta de alevinos a los piscicultores está aún limitada a una corta temporada anual, principalmente porque la reproducción inducida solo se puede lograr durante la época de maduración natural de la especie, la cual está circunscrita a los primeros meses del invierno (marzo- junio) y por el canibalismo que presentan las larvas y postlarvas que reduce de manera dramática la producción de alevinos.

Es ampliamente conocida la participación de las hormonas tiroideas durante la reproducción de varias especies de teleósteos, las cuales en muchos casos actúan sinérgicamente con las hormonas gonadotropinas, mientras que en otros regulan o, inclusive, bloquean la acción de estas (Brown et al. 1987, Tagawa y Hirano 1987, Cyr y Eales 1988, Dickhoff et al. 1989, Leatherland et al. 1989a, b, y Lam 1994).

En peces de agua dulce, los resultados hasta ahora reportados de los efectos de la administración de T3, junto con las hormonas gonadotrópicas en los protocolos de inducción de la maduración final y el desove, sobre el desarrollo y crecimiento de larvas durante las primeras horas de vida son aún contradictorios (Brown et al. 1987, 1988, Soares 2000). En consecuencia, este trabajo tuvo como objetivo evaluar el efecto de la administración preovulatoria de la hormona triiodotironina (T3) sobre la eficiencia del proceso reproductivo inducido y el desarrollo y sobrevivencia de las lar vas del yamú, una especie promisoria para la acuicultura continental colombiana.

MATERIALES Y MÉTODOS

El trabajo fue realizado durante dos épocas reproductivas del yamú (marzo - mayo), correspondientes a los años 2000 y 2001, en el Laboratorio de Reproducción de Peces Tropicales de la Estación Piscícola del Instituto de Acuicultura de la Universidad de los Llanos (Villavicencio–Meta– Colombia). Se utilizaron 48 hembras adultas, con un peso corporal de 2,1 ± 0,4 Kg. y una longitud total 49,5 ± 2,5 cm. sexualmente maduras, criadas y mantenidas en cautiverio, cultivadas en estanques de tierra a una densidad de 300 g de peso vivo por m² y alimentadas con una ración comercial para peces con un contenido de 30% y 3000 Kcal.g^-1 de proteína y energía bruta, respectivamente; suministrada una vez al día durante seis días de la semana.

Los ejemplares fueron seleccionados de acuerdo con el estado de maduración de sus gónadas, siguiendo los criterios definidos por Woynarovich y Horvath (1983) y Arias (2002), y la ovulación inducida de la manera siguiente: un grupo experimental (Ge), compuesto por 20 ejemplares, tratado con Extracto de Hipófisis de Carpa (EPC) (0,5 y 5 mg.kg^-1 de peso vivo, intervalo de 12 h), más una dosis única de triiodotironina T3 (Syntesis ®), (20 mg.kg^-1 de peso vivo disuelta en 0,1 mL de aceite de hígado de bacalao), aplicada al momento de la primera aplicación de EPC. Un segundo grupo, testigo (Gt), conformado por 22 ejemplares, fue inducido con EPC en el mismo protocolo del grupo experimental, pero sin la aplicación de T3. Finalmente, un tercer grupo control (Gc) de 6 ejemplares, fue inyectado con 0,5 mL de aceite de hígado con protocolo similar al del grupo experimental. Los machos recibieron una única dosis de 4 mg.kg^-1 de EPC al momento de la aplicación de la última dosis de las hembras.

Las condiciones ambientales durante los procedimientos reproductivos fueron: temperatura 26,5 ± 0,2^o C, pH 6,3 ± 0,2 y oxígeno disuelto 5.8 ± 0,4 mg.l^-1.

Para cada hembra se registró el tiempo de latencia (tiempo transcurrido entre la aplicación de la última dosis inductora y el momento de la ovulación), procediéndose de manera inmediata a obtener los oocitos por estrujamiento, previa tranquilización de las mismas. Los óvulos fueron fertilizados en seco empleando siempre semen con movilidad masal superior de 80%. De cada desove fue determinado el peso, cantidad de huevos por gramo y colectadas y evaluadas muestras de los mismos para diámetros oocitarios. 6 y 10 h después de la fertilización fueron medidos los porcentajes de fertilidad y sobrevivencia embrionaria respectivamente (Arias 2002).

A las 8 h posteclosión (HPE), lar vas obtenidas de cada desove, por triplicado, a una densidad de 100 larvas / litro, fueron llevadas a acuarios de 10 litros de capacidad (ocho litros útiles), con aireación y recambio de agua (10%/hora) constantes, (temperatura 27,2±0,1 ^ºC, pH 6,8±0,1 y oxígeno disuelto 7,1 ± 0,2 mg.l^-1) (Atencio, 2000). A partir de las 32 HPE y hasta las 72 HPE, cada acuario recibió cada 3 h diurnas, un equivalente de cinco nauplius de Artemia salina recién eclosionada / larva, corregido cada 6 h y retirado por sifoneo el exceso de Artemia 1 h después de ofrecida. Muestras de 30 larvas cada 6 h fueron tomadas de cada réplica, las que fueron medidas y pesadas. Los registros fueron analizadas mediante ANOVA y comparados con prueba “t” de Studend, utilizando el programa SAS-99.

R E S U L T A D O S

Las hembras control, inyectadas con aceite de hígado de bacalao, no ovularon. La Tabla 1 presenta los resultados obtenidos para los grupos tratamiento experimental y tratamiento testigo.

 

Tabla 1. Desempeño reproductivo de hembras de Brycon siebenthalae inducidas a la ovulación con EPC y tratadas o no tratadas con T3.

 

Se observó una disminución significativa en el tiempo de latencia para la ovulación y en el tiempo de latencia para la de eclosión de los La figura 1 ilustra el crecimiento en longitud durante el tiempo del experimento en larvas de los dos tratamientos.

A las 72 HPE las diferencias no fueron significativas entre los dos gr upos; sin embargo, se puede apreciar un relativo mayor crecimiento y homogeneidad en las larvas hijas de las madres tratadas con T3 embriones de hembras tratadas con T3 pero no diferencias para los demás indicadores de la eficiencia reproductiva entre los grupos.

En la figura 2 se muestra la sobrevivencia de las larvas tratadas o no tratadas con T3.

En los dos grupos se observó canibalismo; sin embargo, este fue menos severo en las larvas descendientes de hembras tratadas con T3, por lo tanto es posible inferir que la menor sobrevivencia larval observada en este grupo, puede ser ocasionada por otros factores diferentes al canibalismo.

 

Figura 1: Crecimiento en longitud entre las 32 y 72 h de cultivo de larvas de Brycon siebenthalae, provenientes de hembras tratadas o no tratadas con T3.

 

Figura 2. Sobrevivencia final de larvas obtenidas de hembras de Brycon siebenthalae tratadas y no tratadas con T3

 

D I S C U S I Ó N

El primer efecto significativo de la administración de la hormona T3 sobre el comportamiento reproductivo de hembras de yamú fue la disminución del tiempo de latencia a la ovulación. Observación similar fue reportada en trucha arco iris ( Oncor hynchus mykiss) por Sullivan et al. (1989), quienes explicaron el posible efecto sinérgico de la T3 sobre las gonadotropinas, el cual se traduce en un menor tiempo para la ovulación en las hembras tratadas. En algunos peces se ha encontrado que las hormonas tiroideas actúan sinérgicamente con las gonadotropinas (GtH), estimulando la esteroidogénesis gonadal inducida con GtH y el desarrollo de los ovocitos (Tachihara et al 1977, Cyr y Eales 1988 y Dickhoff et al. 1989), lo cual explicaría el comportamiento aquí encontrado.

El segundo efecto encontrado fue sobre el desarrollo embrionario, el cual se vio acelerado significativamente. Es conocida la presencia de hormonas tiroideas en el vitelo y embriones de teleósteos (Sullivan et al. 1987, Tagawa y Hirano 1987, 1991, Brown et al. 1988, 1989, Leatherland et al. 1989a, b, Tagawa et al. 1990 a, b, Reddy y Lam 1992, Lam 1994 y Soares et al. 1998). Brown et al. (1988,) en Morore saxatilis, Kobuke et al. (1987) en Oncorhynchus kisutch y Tagawa y Hirano (1987) en Oncorhynchus keta, encontraron que las hormonas tiroideas son transferidas por las madres a los ovocitos en desarrollo durante la vitelogénesis y después de esta, como lo confirmaron estudios de Tagawa y Hirano (1991), quienes encontraron un aumento creciente de los contenidos de T3 y T4 en el vitelo con el aumento de tamaño de los ovocitos, indicando una incorporación constante de estas hormonas a los ovocitos por vía materna durante la inducción reproductiva. Brown et al. (1988, 1989) ya habían encontrado que las cantidades hormonales en el vitelo dependen además de las concentraciones presentes en el plasma materno. De otra parte se ha comprobado en distintos vertebrados, incluidos peces, que las hormonas tiroideas aceleran el desarrollo embrionario y larval, así como la metamorfósis (Inui y Miwa 1985, Miwa y Inui 1987, Hirata et al. 1989, De Jesús et al. 1998). Lo anterior indica que el tratamiento agudo a que fueron sometidas las hembras tratadas con T3 no les afectó notoriamente y que hubo una mayor transferencia de T3 maternal al vitelo de los oocitos durante el proceso inductivo el cual aceleró la ovulación y una transferencia al embrión desde el vitelo durante la embriogénesis, que condujo a una disminución del tiempo de eclosión, sin afectar la fertilidad y sobrevivencia embrionaria. Ayson y Lam (1993), administraron hormonas tiroideas en tratamientos preovulatorios, encontrado que ello aumentó los niveles de T3 y T4 en el plasma materno, vitelo ovocitario y saco vitelino de larvas de rabbit fish. Mylonas et al. (1994), utilizando procedimientos similares en trucha arco iris, confirmaron el aumento tanto en sangre materna como en el vitelo, sin que haya influido sobre la respuesta a la ovulación, ni acelerado el desarrollo embrionario y lar val como tampoco afectó la tasa de fertilización y sobrevivencia embrionaria, pero si incrementó la prevalencia de anormalidades esqueléticas en las larvas al final de la absorción del saco vitelino. Lo anterior confirma sobre las variadas respuestas que las especies pueden ofrecer a tratamientos como los experimentados.

El efecto de las hormonas tiroideas sobre la sobrevivencia y crecimiento en las primeras horas de vida de larvas de peces es también poco claro y un tanto contradictorio (Lam 1994). El incremento de T3 en los ovocitos por suplementación vía materna incrementa la sobrevivencia larval en trucha arco iris (Brown et al. 1988), tilapia (Reddy y Lam 1992) y matrixâ Soares 2000), así como aumenta el crecimiento, diferente a lo hallado en este trabajo, en particular la sobrevivencia. En otros peces no se hallaron efectos significativos (Tagawa y Hirano 1991; Ayson y Lam, 1993).

En cuanto al canibalismo este se inició en hijas de los dos tratamiento a las 32 HPE (Venegas y Lombo 1996; Atencio 2000), coincidiendo con el inicio de la alimentación exógena, como ocurre en otros Brycon (Cecarelli 1997, Senhorini 1999 y Soares 2000). Es posible adjudicarle el menor canibalismo observado en larvas de yamú hijas de madres tratadas con T3 a la mayor homogeneidad en la talla, lo cual podría haber prevenido que lar vas de mayor tamaño hayan predado más activamente larvas chicas (Hecht y Pienaar 1993). Lo anterior lo explica Urbinati et al. (2001) para fenómeno similar encontrado en lar vas de Br ycon cephalus, asegurando que las hormonas tiroideas estimulan la producción de energía necesaria para la metamorfósis manteniendo un crecimiento más uniforme, como se observó aquí.

C O N C L U S I O N E S

La aplicación de 20 mg.kg^-1 de hormona triiodotironina simultáneamente con EPC en el protocolo para la reproducción inducida de hembras yamú no afecta significativamente la respuesta a la ovulación; sin embargo, puede disminuir las latencias a la ovulación y eclosión, así como retardar el desarrollo embrionario, sin afectar las tasas de fertilidad y sobrevivencia embrionaria.

AGRADECIMIENTOS

Los autores agradecen a COLCIENCIAS y a la Universidad de los Llanos por el apoyo brindado para la realización de este trabajo. A la profesora Elizabeth Aya Baquero por su colaboración durante la realización de los experimentos.

B I B L I O G R A F Í A

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